解一下RPMI-1640培養(yǎng)基的配置方法吧

　　RPMI全稱為RoswellParkMemorialInstitute，指的是洛斯維·帕克紀念研究所。RPMI是這個研究所研發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。
 

　　RPMI-1640培養(yǎng)基是Moore等人于1967年在RoswellParkMemorialInstitute研制，最初針對淋巴細胞培養(yǎng)設(shè)計，含BSS+21種氨基酸+維生素11種等?，F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各種正常細胞和癌細胞的培養(yǎng)，尤其是懸浮細胞的培養(yǎng)，是使用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。
 

　　(也可以參考使用用來養(yǎng)其他細胞，比如我養(yǎng)的巨噬細胞就是典型的貼壁細胞，可以用1640來養(yǎng)。曾經(jīng)試過用DMEM養(yǎng)這個巨噬，結(jié)果全部不貼壁，浪費了珍貴的細胞)
 

　　RPMI-1640培養(yǎng)基最初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設(shè)計的，其含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或者任何生長因子，需搭配血清和無血清添加物使用。
 

　　下面讓我們一起來了解一下RPMI-1640培養(yǎng)基的配置方法吧
 

　　一、干粉培養(yǎng)基的過濾配制
 

　　1、將1升量的干粉在950ml細胞培養(yǎng)級純凈水中溶解
 

　　2、加入2克碳酸氫鈉，繼續(xù)攪拌至溶解
 

　　3、用1N鹽酸或1N氫氧化鈉調(diào)整到要求的pH，并將溶液體積調(diào)至1000ml
 

　　4、在超凈臺內(nèi)用0.22um濾膜負壓過濾
 

　　5、將培養(yǎng)基在2~8℃避光保存
 

　　二、高壓滅菌型的配制
 

　　1、將1升的高壓滅菌型干粉在900ml細胞培養(yǎng)級純凈水中溶解
 

　　2、將溶液pH調(diào)至4.0并將溶液體積調(diào)至960ml
 

　　3、在121℃，15psi高壓消毒5分鐘
 

　　4、將培養(yǎng)基迅速取出，避免過久加熱引起成份分解或液體蒸發(fā)減少
 

　　5、待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，無菌操作加入29.3ml的無菌7.5%碳酸氫鈉溶液，及10ml的無菌200mML-谷氨酰胺
 

　　6、如有必要，用無菌的1N鹽酸或1N氫氧化鈉調(diào)整pH
 

　　7、將培養(yǎng)基在2~8℃避光保存